E-Click EdU Cell Proliferation Flow Cytometry Assay Kit (Green，FITC)

Принцип обнаружения: Анализы пролиферации клеток широко применяются для оценки жизнеспособности клеток, генотоксичности и действия противоопухолевых препаратов. Прямое выявление синтеза ДНК в клетках считается наиболее точным методом определения пролиферации клеток. Первоначально широко используемым методом обнаружения синтеза ДНК был метод включения меченых радионуклидом нуклеозидов, однако он был существенно ограничен из-за радиоактивного загрязнения и сложности анализа на уровне отдельных клеток, и постепенно был заменён методом BrdU, основанным на антительном детектировании. Метод BrdU включает множество этапов и требует использования антител к BrdU, что приводит к множеству факторов влияния и низкой стабильности. Метод EdU основан на включении EdU и последующей «click»-реакции, без использования антител, отличается простотой выполнения и высокой чувствительностью. Это новый метод, усовершенствованный на основе BrdU, который постепенно его заменяет. EdU (5-этинил-2-дезоксиуридин) является аналогом тимидина; EdU может замещать тимидин в процессе синтеза ДНК и включаться в новосинтезированную ДНК. Ацетиленовая группа EdU может реагировать с флуоресцентно мечеными азидными зондами (такими как FITC Azide, Elab Fluor 488 Azide, Elab Fluor 594 Azide, Elab Fluor 647 Azide) в присутствии ионов одновалентной меди с образованием стабильного триазольного кольца. Эта реакция очень быстрая и называется «click»-реакцией. В результате «click»-реакции новосинтезированная ДНК метится соответствующим флуоресцентным зондом, что позволяет обнаруживать пролиферирующие клетки с помощью флуоресцентного оборудования.

Метод детекции: флуориметрический метод, проточная цитометрия
Тип образца: образцы клеток
Время анализа: 2 часа
Прибор: проточный цитометр
Тип красителя: FITC
Ex/Em: 490/530
Канал: FITC
Другие необходимые реагенты: PBS буфер (с 1% BSA) (pH 7,2–7,4), PBS (с 1% сапонина) (pH 7,2–7,6), 4% параформальдегид (в PBS) (E-IR-R113), деионизированная вода
Хранение: при −20°C, 12 месяцев, в защищённом от света виде
Срок годности: 12 месяцев
Транспортировка: охлаждающий пакет