Cellular Cuprous Fluorometric Assay Kit

Принцип детекции
Аномальное накопление ионов меди(I) (Cu⁺) в клетках индуцирует олигомеризацию ключевых компонентов комплекса пируватдегидрогеназы, модифицированных липоевой кислотой, что нарушает цикл трикарбоновых кислот, вызывает протеотоксический стресс и приводит к гибели клеток.

Клеточные ионы меди(I) способны катализировать превращение субстрата с образованием флуоресцентных продуктов; чем выше концентрация ионов меди, тем больше флуоресцентных веществ образуется за единицу времени. Флуоресценция регистрируется при длине волны возбуждения 395 нм и длине волны эмиссии 480 нм.

Тип образца
Клетки

Метод определения
Флуорометрический метод

Оборудование
Флуоресцентный планшетный ридер (Ex/Em = 395 нм / 480 нм)

Область применения
Купроптоз

Дополнительные реагенты
Физиологический раствор (0,9% NaCl)

Условия хранения
Хранить при −20 °C в течение 12 месяцев, защищая от света

Срок годности
12 месяцев

Точность
Межсерийная вариабельность (CV): 5,0–8,0%
Внутрисерийная вариабельность (CV): 3,0–6,0%

Объём образца
20 мкл (клеточный гомогенат)

Время анализа
50 минут